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灰樹(shù)花——又名舞茸,是是擔(dān)子菌綱、多孔菌科的食、藥兼用蕈菌。本研究觀察灰樹(shù)花作用患瘤小鼠對(duì)移植性腫瘤的抑制作用,并對(duì)抗腫瘤作用的免疫機(jī)制進(jìn)行初步探討。
實(shí)驗(yàn)的材料與方法:
材料:
1、動(dòng)物昆明小鼠體質(zhì)量為l8~22g,3—4周齡,雌性90只購(gòu)自佳木斯大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心。
2、試劑灰樹(shù)花多糖針劑,含量>50%,注射用環(huán)磷酰胺(CTX),抗T細(xì)胞單克隆抗體L3T4、Lyt-2以及FITC兔抗鼠IgG,小鼠肝腹水瘤細(xì)胞系(H22)。
方法:
建立模型本研究設(shè)實(shí)驗(yàn)組(I、Ⅱ、Ⅲ劑量組)和患瘤模型對(duì)照組、陽(yáng)性對(duì)照組(CTX),以及正常組,每組15只。灌胃3周后接種,制成模型。
對(duì)小鼠H22的抑制作用實(shí)驗(yàn)組按分別按照100、200、400mg/kg灌胃給藥1次/d,陽(yáng)性對(duì)照組給環(huán)磷酰胺100mg/kg,患瘤模型對(duì)照組給生理鹽水0.4ml。計(jì)算抑瘤率。
脾臟T細(xì)胞亞群的檢測(cè)分離脾細(xì)胞,然后調(diào)整細(xì)胞濃度為1X10個(gè)/ml,按照操作說(shuō)明完成后滴片,求出熒光細(xì)胞百分率。
結(jié)果:
對(duì)小鼠H22的抑制:灰樹(shù)花多糖I、Ⅱ、Ⅲ組患瘤動(dòng)物的瘤重與患瘤模型組相比均有明顯的抑制作用,陽(yáng)性對(duì)照組亦有明顯的抑制作用(P<0.05)。
T細(xì)胞亞群的檢測(cè)荷瘤鼠的輔助性T細(xì)胞L3T4水平明顯下降,抑制性T細(xì)胞Lyt-2水平亦顯著下降,L3T4/Lyt-2比值極顯著下降。而灰樹(shù)花多糖Ⅱ、Ⅲ組恢復(fù)到正常小鼠水平。
討論:
本研究通過(guò)灰樹(shù)花多糖對(duì)患瘤鼠瘤重等影響的分析,從瘤體比的統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果更能清楚地說(shuō)明灰樹(shù)花多糖組的作用效果明顯優(yōu)于陽(yáng)性對(duì)照組。本研究發(fā)現(xiàn)患瘤鼠的L3T4和Lyt-2百分率均明顯下降,因此,L3T4/Lyt-2比值亦明顯下降。給予灰樹(shù)花多糖后L3T4和Lyt-2百分率均有明顯升高。L3T4百分率恢復(fù)到正常小鼠水平,L3T4/Lyt-2比值明顯升高。灰樹(shù)花多糖Ⅱ、Ⅲ組的L3T4/Lyt-2比值恢復(fù)到正常小鼠水平,表明灰樹(shù)花多糖具有改善患瘤鼠免疫功能的作用。因此,給予灰樹(shù)花多糖升高的Lyt-2或許是TCS表型,證明L3T4在腫瘤免疫中是最為關(guān)鍵的效應(yīng)細(xì)胞。
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