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骨化三醇膠丸的毒理研究表明，骨化三醇膠丸有致畸作用：在給予家兔骨化三醇膠丸最大推薦量的2~6倍時，胎兒出現外表和骨骼畸形。那么，骨化三醇膠丸有什么副作用呢？
骨化三醇膠丸長達15年的臨床使用治療所有適應癥，結果顯示不良反應發生率很低，包括高鈣血癥在內的發生率為0.111%或更低。而且目前臨床上也有用骨化三醇膠丸治療佝僂病的案例，取得良好效果，且沒有出現寶寶吃骨化三醇膠丸后有依賴性。
不過如果用藥不當，也會引起毒副作用。由于骨化三醇能產生維生素D的作用，所以可能發生的不良反應與維生素D過量相似。如高血鈣綜合癥或鈣中毒(取決于高鈣的嚴重程度及持續時間)。
骨化三醇膠丸偶見的急性癥狀包括食欲減退、頭痛、嘔吐和便秘。慢性癥狀包括營養不良、感覺障礙，拌有口渴的發熱、尿多、脫水、情感談漠，發育停止及泌尿道感染。
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