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2019年2月20日,& mdash嵌合抗原受體T (CAR-T)細胞療法在血液腫瘤患者中產生了顯著的療效。然而,該領域的挑戰之一是缺乏一種簡單有效的方法來檢測免疫效應細胞上的CARs。
圖片來源:Sci Rep
最近,南加州大學凱克醫學院的研究人員開發了一種基于熒光素酶的新方法(稱為Topanga試驗),用于檢測T細胞上CARs的表達。該方法利用了一種叫做Topanga試劑的重組融合蛋白,由CAR靶標的胞外結構域和海洋熒光素酶或其衍生物組成。
這種方法包括用托潘加試劑孵育表達CAR的細胞,洗滌幾次并進行熒光檢測。該方法可以檢測基于免疫球蛋白或非免疫球蛋白抗原結合域的CARs。
研究人員還發現,在Topanga試劑中添加表位標簽不僅可以實現一步純化過程,還可以使這種試劑通過流式細胞儀檢測CARs細胞。同時,含有分泌的Topanga試劑的上清液可直接用于生物發光檢測或流式細胞術檢測,無需任何蛋白質純化。
基于此,研究人員認為Topanga試驗是一種高靈敏度、高特異性、方便、經濟、多功能的檢測CARs的新方法。
接下來,研究人員計劃研究Topanga試驗是否可用于監測CAR T細胞注射到患者體內后的擴增和維持情況。如果能夠實現,不僅可以幫助醫生找出可能因細胞擴增過快而發生毒性反應的患者,還可以幫助患者找出可能因CAR-T細胞存在時間過短而發生癌癥復發的患者。(Bioon.com生物谷)
參考文獻:
Preet M. Chaudhary等.一種基于熒光素酶的檢測嵌合抗原受體的新方法.《科學報告》(2019年)。DOI:10.1038/s 14598-018-38258-z